Суперкритикалық бұрыштық флуоресценттік микроскопия - Supercritical angle fluorescence microscopy

Әдеттегі SAF-қондырғы

Суперкритикалық бұрыштық флуоресценттік микроскопия (SAF) - бұл флуоресцентті түрлерді (ақуыздар, биомолекулалар, фармацевтикалық препараттар және т.б.) және олардың мінез-құлқын жақын немесе тіпті анықтау және сипаттау әдісі. адсорбцияланған немесе беттерде байланысқан. Әдіс молекулаларды қоршаған флуоресцентті түрлердің жоғары концентрациясы болған жағдайда да, бетінен 100-ден 0 нанометрге дейінгі қашықтықта байқауға қабілетті. Лазерлік жарықпен үлгіні қоздыру үшін асфералық линзаны қолдану, флуоресценция Үлгі шығарған заттар жоғарыда жинақталған критикалық бұрыш туралы жалпы ішкі көрініс параболалық оптика арқылы детекторға бағытталады. Әдіс 1998 жылы зертханаларда ойлап табылды Стефан Зегер кезінде Регенсбург университеті / Германия және кейінірек Цюрих университеті / Швейцария.

Су мен шыны арасындағы шекарадағы флуоресценция (диполь) бағытының полярлық сызбалары

SAF микроскопия принципі

SAF микроскопиясының жұмыс принципі келесідей: флуоресцентті үлгі бетіне жақындағанда флуоресценцияны изотропты түрде шығармайды, бірақ шығарылған флуоресценцияның шамамен 70% -ы қатты фазаға бағытталған. Мұнда негізгі бөлік сыни бұрыштан жоғары қатты денеге енеді.[1] Эмитент бетінен 200 нм биіктікте орналасқан кезде қатты денеге сыни бұрыштан жоғары түсетін люминесценттік жарық күрт төмендейді. Демек, SAF микроскопиясы молекулалар мен бөлшектерді беттерде немесе оларға жақын жерлерде және массада бар барлық басқа үлгілерді бөлуге өте қолайлы.[2][3]

Әдеттегі SAF-қондырғы

Әдеттегі SAF қондырғысы лазерлік сызықтан тұрады (әдетте 450-633 нм), ол дихроикалық айна арқылы асфералық линзаларға шағылысады. Линза бөлшектердің флуоресценциясына әкеліп, үлгіні лазер сәулесін фокустайды. Флуоресцентті жарық детекторға жетпес бұрын параболалық линзадан өтеді, әдетте а фототүсіргіш түтік немесе қар көшкінінің фотодиоды детектор. Сондай-ақ, SAF элементтерін массивтер ретінде орналастыруға болады, және көптеген аналитиктерді анықтауға мүмкіндік беретін өнімді CCD-ге түсіруге болады.[4]

Таңдалған басылымдар

  1. ^ Дж.Эндерлейн, Т.Рукстюль, С.Сигер: Беттік генерацияланған флуоресценцияны жоғары тиімді оптикалық анықтау. Қолдану. Бас тарту 38 (4) 724-32 (1999)
  2. ^ T. Ruckstuhl, M. Rankl, S. Seeger: Биокенсорлар және биоэлектроника 18 (9) 1193-1199 (2003) суперкритикалық бұрыштық флуоресценттік құрал (SAF) көмегімен жоғары сезімтал биосенсинг.
  3. ^ Т.Рукстюль, С.Сигер: Контокалды жалпы-ішкі шағылысқан флуоресценциялы микроскопия арқылы аттолиттерді анықтау көлемі, Оптикалық хаттар 29, 569-571 (2004)
  4. ^ Хилл, D; McDonnell B; Жүрек S; Basabe-Desmonts L; Көк R; Трнавский М; McAtamney C; О'Кеннеди Р; Maccraith B (11 мамыр 2011). «Флуоресценцияны күшейту үшін суперкритикалық бұрыштық флуоресценцияны қолданатын бір реттік биохиптік платформа». Биомедициналық микроқұрылғылар. 13 (4): 759–67. дои:10.1007 / s10544-011-9546-2. PMID  21559870.